BỆNH của các sinh vật thủy sản

Dis Aquat Org. 61: 227-233, 2004 Được đăng 04 Tháng 11

GIỚI THIỆU

Lần đầu tiên được xác định trong Texas vào năm 1985, hoại tử

Hepatopancreatitis (NHP) là một bệnh do vi khuẩn nặng

tôm penaeid nuôi sản xuất đáng kể

bệnh lý và tử vong lên đến 95% trong các ao nuôi bị ảnh hưởng

(Johnson 1990). Từ năm 1985, NHP đã được quan sát trong

Peru, Ecuador, Venezuela, Brazil, Panama và Costa

Rica. NHP còn được gọi là u hạt gan

viêm tụy, Texas hoại tử Hepatopancreatitis,

Tỷ lệ tử vong Hội chứng và Peru hoại tử Texas Pond

epatopancreatitis. Loài bị ảnh hưởng bởi NHP là Lito

Penaeus vannamei, L. setiferus, L. stylirostris, Farfan-

tepenaeus aztecus và F. californiensis (Lightner

1996).

Tác nhân gây bệnh của NHP là Gram âm,

pleomorphic, tác nhân gây bệnh nội bào bắt buộc NHP

Vi khuẩn (NHPB), một thành viên của các α-Proteobacteria

mô tả ban đầu là 3 vi sinh vật: một pleomorphic

hình que rickettsia-như vi khuẩn, một dạng xoắn ốc của

một loại vi khuẩn mollicute thích và mollicute một sợi

vi khuẩn (Krol et al. 1991). Hơn nữa hình thái

phân tích bằng chứng cho một loại vi khuẩn trước

được gửi trong 2 hình thức khác nhau (Frelier et al. 1992, Lightner et

al. 1992). Các hình thức chủ yếu là hình que, rick

ettsia-như, thiếu roi và đôi khi trưng bày một

ngang hẹp khu vực chỉ mang tính nhân bản của

nhị phân phân hạch (Frelier et al 1992). Dạng xoắn ốc pos

sesses 8 roi trên đỉnh cơ bản và 1 hoặc có thể

2 roi trên đỉnh xoắn. Cả hai biến thể của NHPB

© Inter-Nghiên cứu 2004 www.int-res.com * Tương ứng với tác giả. Email: jeff.lotz @ usm.edu

Thí nghiệm nhiễm trùng tôm Thái Bình Dương trắng

Tôm thẻ chân trắng Litopenaeus với hoại tử Hepto

viêm tụy (NHP) vi khuẩn do tiếp xúc với hệ điều hành mỗi

Amanda G. Vincent, Verlee M. Breland, Jeffrey M. Lotz *

Sở Khoa học ven biển, Đại học Nam Mississippi, Phòng thí nghiệm nghiên cứu Gulf Coast, PO Box 7000,

Ocean Springs, Mississippi 39566-7000, USA

Tóm tắt: hoại tử Hepatopancreatitis Vi khuẩn (NHPB), gây hoại tử

Hepatopancreatitis, được truyền đi trong thành công cá nhân cô lập Kona chứng khoán Litopenaeus

tôm thẻ chân trắng thông qua tiếp xúc với mỗi hệ điều hành. Động vật (140) cá nhân tiếp xúc bằng miệng để một mảnh 0,05 g

của gan tụy NHPB nhiễm và 120 kiểm soát động vật đã từng tiếp xúc với một mảnh g 0,05

NHPB âm gan tụy. Tôm được duy trì trong container Sterilite ® với xấp

xỉ 4 lít nước biển nhân tạo tại 30 ‰ độ mặn và 30 ° C trong 60 d. Tỷ lệ tử vong của tôm bị nhiễm bệnh

quan sát từ ngày 16 đến ngày 51 sau phơi nhiễm. Động vật mắc bệnh duy trì hoạt động nuôi giảm

và ruột trống rỗng. Một số động vật bị nhiễm bệnh đã phát triển một gan tụy nhợt nhạt đáng chú ý

thông qua mai. Xác suất sống còn phù hợp với một phân phối Weibull và sự sống còn tham số analy

sis cho thấy sự sống còn giảm do nhiễm trùng NHPB. Thời gian gian sống trung bình của động vật nhiễm NHPB

được 34,5 d. Sau khi điều chỉnh tỷ lệ tử vong nền hàng ngày trong điều khiển, có nghĩa là cấp tính hàng ngày chết

ITY NHPB được ước tính khoảng 0,09, giá trị thấp hơn nhiều so với ước tính cho các bệnh khác ở Kona

L. vannamei chứng khoán như Virus Hội chứng địa điểm trắng (0.40) và hội chứng virus Taura (0,30). Một

mãn tính, hoặc người vận chuyển, nhà nước đã không chứng minh trong NHPB Kiểm dịch động vật bởi vì tất cả ani-NHPB dương

mals kinh nghiệm tử vong và không có động vật còn sống sót 60 d tiếp xúc với hậu được chẩn đoán NHPB

tích cực thông qua PCR hoặc mô học.

TỪ KEY: hoại tử Hepatopancreatitis NHP tôm bệnh tôm nuôi trồng thủy sản

Republication bán lại hoặc không được phép mà không có sự đồng ý bằng văn bản của Aquat publisherDis Org 61: 227-233, 2004

, dạng hình que nhỏ là 0,25 0,9 mm và

dạng xoắn ốc là 0,25 từ 2 đến 3,5 mm. Một không rõ ràng, liên

trung gian dưới hình thức trưng bày hình thái của cả hai biến thể

được quan sát thấy thỉnh thoảng trong gan tụy bị nhiễm bệnh

các tế bào biểu mô, điều này cho thấy sự phát triển từ

replicative hình que hình thức thành dạng xoắn ốc

(Lightner et al 1992).

Tổng dấu hiệu của nhiễm trùng NHPB trong tôm penaeid

bao gồm lượng thức ăn chăn nuôi giảm, ruột rỗng, vỏ mềm,

cơ quan trạng thái bình thường, bề mặt ô nhiễm nặng bởi epicommensal

sinh vật, mang màu đen hoặc tối, chromatophore

mở rộng cho sự xuất hiện của các cạnh tối tăm

pleopods, hôn mê và được đánh dấu teo

gan tụy. Gan tụy tôm là

chỉ trang web của nhiễm trùng cho NHPB. Tôm bị nhiễm

NHPB, gan tụy có thể xuất hiện nhạt với một

trung tâm màu trắng chứ không phải là tan bình thường đến cam

màu sắc. Trong một số các bệnh nhiễm trùng NHPB nghiêm trọng, gan-

tuyến tụy có thể nhạt với các vệt đen, cho thấy

melanization ống hepatopancreatic, và

gan tụy có thể xuất hiện mềm mại và chảy nước mắt với một

trung tâm chứa đầy chất lỏng (Lightner 1996).

Các yếu tố môi trường như nhiệt độ và

độ mặn được cho là rất nhiều ảnh hưởng đến sự xuất hiện

bệnh NHPB tôm penaeid nuôi trồng thuỷ sản. Out-

phá vỡ của NHPB ở Texas theo nhiệt độ

lớn hơn 29 đến 31 ° C ở độ mặn 20 đến 40 ‰ (thường

Lier et al. 1992). Trong năm 1993, bịnh dịch thú của NHPB ở Peru

sau đó nhiệt độ lớn hơn 29-35 ° C trong salin

ities của 20 đến 38 ‰ (Lightner & Redman 1994). Trong Ngoaøi

tion, điều kiện tương tự như những người gặp phải ở Texas

và Peru đã được gắn liền với sự bùng phát của NHPB

1993-1995 tại Venezuela, Brazil, Ecuador, Costa

Rica và Panama (Lightner 1996).

Đã được thử nghiệm truyền của NHPB

đạt được thông qua tiêm một cô lập của các hình thức thanh

của vi khuẩn (Frelier et al. 1993). Cố gắng-cul

trồng thủy NHPB thông qua các phương pháp truyền thống vi khuẩn

đã không thành công (1996 Lightner, Braasch et al.

1999), do đó, hệ thống tiếp xúc với thực nghiệm

dựa vào duy trì NHPB tôm sống với

tiêm để truyền. NHPB là không có khả năng được

truyền trong tự nhiên bằng cách tiêm, do đó, lây truyền

gồm thông qua các tiêu hóa của vật liệu truyền nhiễm, tức là

ăn thịt đồng loại của tôm bị nhiễm bệnh đã chết hoặc đang hấp hối, có thể được

một tuyến đường tự nhiên hơn.

Mục đích của nghiên cứu của chúng tôi là phát triển một

giao thức tự nhiên tiếp xúc bằng cách cố gắng mỗi os xuyên

Nhiệm vụ của NHPB Litopenaeus vannamei. Chúng tôi

mô tả hệ thống tiếp xúc với mỗi hệ điều hành, tài liệu suc-

cessful tiếp xúc miệng và đặc trưng cho nhiễm trùng

Tất nhiên trong phòng thí nghiệm tiếp xúc bằng miệng. Ngoài ra, chúng tôi

kiểm tra giả thuyết cho rằng trong các mô hình dịch

rằng tỷ lệ tử vong là hằng số đối với động vật bị nhiễm bệnh

theo thời gian.

TÀI LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Bảo trì dài hạn của NHPB để Litopenaeus

tôm thẻ chân trắng. Kể từ tháng 6 năm 2001, NHPB đã được chính

tained dài hạn trong các bể có ga hình trụ

Đường kính 183 cm và 76 cm chiều cao có chứa

25 cm chiều sâu của nước biển nhân tạo ở 30 ± 2 ‰ độ mặn

và 30 ± 2 ° C. Các bồn chứa hình trụ được đặt tại một

gây hiệu ứng nhà kính và nhiệt độ được theo dõi hàng tuần và

độ mặn hai tuần một lần. NHPB đã thu được từ tôm

trang trại ở miền nam Texas, Mỹ, trong tháng 6 năm 2001. Ban đầu, xe tăng

được thả với khoảng 50 dễ bị certi

fied cụ thể gây bệnh miễn phí (SPF) L. vannamei Juve-

Niles khác nhau, kích thước từ 3 đến 15 g thu được từ các

Viện Đại dương ở Hawaii và được cho ăn thức ăn viên thương mại

hàng ngày. Cổ phiếu này, trong đó có nguồn gốc như sau ấu trùng từ

spawns hoang dã tại Sinaloa, Mexico, trong năm 1989, là một phần của

Hoa Kỳ Chương trình Nuôi tôm biển

(USMSFP) và được gọi là USMSFP Kona chứng khoán

(Pruder et al 1995, Lotz et al. 2003).

Cephalothoraxes của tôm bị nhiễm bệnh với NHPB

đã được gỡ bỏ bởi một vết cắt ngang bụng /

cephalothorax đường giao nhau để đảm bảo truy cập-gan

tuyến tụy (trang web của NHPB nhiễm trùng) và được đặt trong

bình với động vật nhạy cảm. Nhạy cảm tôm

bị bỏ đói trong 3 d đã được thêm vào bể khoảng

mỗi 21 đến 28 d. Thức ăn tôm dễ bị ảnh hưởng khi

tôm bị nhiễm bệnh hấp hối và chết, tiếp tục

chu kỳ tiếp xúc và nhiễm trùng.

Thách thức mô hình của Litopenaeus vannamei

NHPB. SPF Kona chứng khoán L. vannamei người chưa thành niên của aver

tuổi kích thước 5,62 g (khoảng 3,00-9,27 g) đã được cá nhân

được đặt trong ga Sterilite ® container (35 cm chiều dài bằng

22 cm chiều rộng bằng chiều cao 12 cm) và duy trì ở

độ sâu 9 cm 30 ± 1 ‰ biển tinh thể nhân tạo ®

Nước biển Marinemix chuẩn bị từ thẩm thấu ngược

lọc nước cho tổng khối lượng khoảng 4 l.

Gan tụy cắt bỏ từ tôm nhiễm NHPB

từ hệ thống bảo trì dài hạn được cân

0,01 g gần nhất và chia thành khoảng

0,05 g phần, đã được giới thiệu vào

Sterilite ® container. Tôm dễ bị ảnh hưởng đã bị bỏ đói

3 d trước khi tiếp xúc với mỗi hệ điều hành để NHPB.

Tôi Thách thức, 20 tôm được mỗi bằng miệng tiếp xúc

một mảnh 0,05 g từ một hepatopan-NHPB nhiễm

creas. Hai mươi tôm kiểm soát được tiếp xúc tương tự như

gan tụy mô NHPB âm. Trong thách thức

lenge II, tôm 120 đã từng tiếp xúc bằng miệng đến 0,05 g

NHPB nhiễm gan tụy và kiểm soát 100

tôm được tương tự như tiếp xúc với bạn tình không nhiễm trùng

Rial. Trong cả hai thách thức, tôm ăn g 0,05

phần của gan tụy trong vòng 1 giờ. Tôm

duy trì trong một waterbath ở 30 ± 1 ° C cho 60 d và cho ăn

thức ăn viên thương mại vào khoảng 5% trọng lượng cơ thể

hàng ngày khác. Nhiệt độ được theo dõi hàng ngày và

228Vincent et al: mỗi hệ điều hành tiếp xúc của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus NHP vi khuẩn

độ mặn hàng tuần. Nước ngọt đã được thêm vào chỉ để thay thế

nước bị mất do bay hơi.

Xét nghiệm chẩn đoán. Hấp hối tôm đã được ủng hộ

cessed cho xét nghiệm phân tử và mô học của

NHPB nhiễm trùng. Một mảnh nhỏ của gan tụy

được sử dụng cho PCR đã được cắt bỏ từ cephalothorax

mỗi tôm hấp hối và được lưu trữ trong một ml 1,5 Eppen

Dorf ống ở -20 ° C. Davidson của AFA (rượu-formalin

định hình axit acetic) được tiêm vào các cephalo

ngực để đảm bảo cố định toàn diện còn lại

gan tụy để phân tích mô học và sau đó

đắm mình trong chất bảo quản từ 48 đến 72 h. Sau đó,

các mô cephalothorax được cắt dọc theo dọc

máy bay, được đặt trong mô-Tek ® uni-cassette và được lưu trữ

trong ethanol 70% trước khi nhúng paraffin, cắt

và nhuộm màu với Hematoxylin và Eosin (Lightner

1996). Mô từ động vật còn sống ở 60 d

được bảo quản theo cách mô tả ở trên. PCR

phân tích của gan tụy theo giao thức

Loy et al. (1996). Sau khi chiết xuất DNA và purifica

tion, các mẫu được pha loãng 1:100 và phân tích bởi một

Cụ thể phản ứng PCR (NHPB Loy et al. 1996,

DiagXotics ® 2002).

Phân tích thống kê. Phân tích sự tồn tại và đường cong phù hợp với

ting được thực hiện với systat 10.0 và SPSS 11,5

(SPSS 2002). Thời gian sống còn theo nghĩa rộng là

thời gian để sự xuất hiện của một sự kiện nhất định (Lee & Wang

2003), trong trường hợp này tử vong do nhiễm trùng NHPB. Với

Thời gian tồn tại là sự thay đổi ngẫu nhiên,

phân phối kết quả có thể được mô tả bởi một

chức năng xác suất tuất. Dữ liệu bị kiểm duyệt xảy ra

khi một số đối tượng trong một nghiên cứu có kinh nghiệm về

enced sự kiện quan tâm bằng cách kết thúc của thời gian nghiên cứu

hoặc bằng cách loại bỏ đầu từ nghiên cứu. Trong thách thức tôi và

II, loại I kiểm duyệt xảy ra khi con vật

quan sát thấy trong một thời gian cố định thời gian (60 d), sau đó

các động vật còn sống sót đã bị giết. Trong kiểm duyệt tôi Loại,

thời gian tồn tại của những động vật sống sót sau

thí nghiệm không biết chính xác nhưng được ghi nhận là

ít nhất là chiều dài của thời gian nghiên cứu. Thách thức II cũng

bao gồm loại I quan sát kiểm duyệt loại bỏ khỏi

nghiên cứu đều đặn thời gian khóa học phân tích

NHPB nhiễm trùng. Thời gian tồn tại của những con vật này

chỉ được biết đến cho đến ngày di chuyển từ các kinh nghiệm-

thuận.

Một phân bố Weibull được áp dụng cho

tồn tại và tỷ lệ tử vong độ tuổi cụ thể

xác suất. Sự tồn tại (Eq. 1) và

nguy hiểm hoặc tử vong tuổi cụ thể chức năng

tion (Eq. 2) của một phân phối Weibull

bao gồm các thông số β (quy mô), η

(Hình dạng) và γ (vị trí) tại t (thời gian).

Cấp nhà nước tử vong ở tôm bị nhiễm bệnh

đã được sửa chữa cho bất kỳ tỷ lệ tử vong trong con-

trol động vật (Eq. 3).

(1)

(2)

(3)

Soto & Lotz (2001) cho rằng, tác nhân gây bệnh

gây ra tỷ lệ tử vong (α) và tỷ lệ phục hồi (ρ)

có thể được ước tính từ 2 phương trình sau đây

mô tả sự năng động của bị nhiễm bệnh và phục hồi

động vật:

Tôi t +1 = I t - I t (α + ρ - α · ρ) (4)

Rt +1 = Rt + I t (ρ - α ρ) (5)

trong đó I là số động vật bị nhiễm bệnh, R là

số lượng động vật hồi phục, t là thời gian, α là tỷ lệ

tỷ lệ tử vong và ρ là tỷ lệ phục hồi của một nhiễm

động vật. Các mô hình toán học cho rằng α và ρ là con:

stant trên toàn dịch bệnh. Hệ thống phương trình này

cho phép lập dự toán của α và ρ bằng cách lặp lại các đoạn

mét cho đến khi các đường cong tuất kết quả tốt nhất phù hợp với

các dữ liệu quan sát thấy trên động vật bị nhiễm bệnh. Nếu không có

phục hồi các loài động vật bị nhiễm bệnh, sau đó ρ = 0 và Eq. (4) có thể

được ước tính:

Nó +1 = I-I (α) (6)

KẾT QUẢ

Truyền

Một sự kết hợp của 2 thách thức bằng cách sử dụng giống hệt meth

ods cho tiếp xúc với miệng của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus

kết quả trong truyền tải thành công của NHPB. Thách thức-

lenge tôi bao gồm 20 tôm, trong khi Challenge II

bao gồm một mẫu lớn hơn 120 tôm (Bảng 1). Thách thức-

lenge tôi đã có một tỷ lệ phần trăm cao hơn nhiều các tiếp xúc

tôm thử nghiệm dương tính NHPB thông qua PCR (60%)

hơn Challenge II (20%) (χ2

= 14,359, p <0,001,

Bảng 1).

NHPB kiểm soát NHPB

Kiểm soát

α

=

-

-

ht ht

ht 1

ht t () () = ⋅ + - β

η

γ β

β 1

-

=

+ 







γ

η

β

229

Thách thức tích cực ngày sống sót trung bình NHPB của% # tiếp xúc

NHPB sau khi thời gian d 60 (d) trên 60 d quan sát

tỷ lệ tử vong

I2060 38,5 18-46

II 120 20 34,7 16-51

I và II 140 26 34,5 16-51

Bảng 1. Hai mỗi thách thức tiếp xúc với hệ điều hành của Kona chứng khoán Litopenaeus vannamei

NHPB (% NHPB dương tính sau 60 d, χ2

= 14,359, p <0.001) Dis Aquat Org 61: 227-233, 2004

Tổng dấu hiệu của nhiễm trùng NHP

Lâm sàng đầu tiên dấu hiệu của nhiễm trùng NHPB CES-

sation cho ăn, diễn ra từ 9 đến d 26 bài

tiếp xúc. Rỗng ruột quan sát thấy từ 15 đến d 40 bài

tiếp xúc được theo dõi bởi tỷ lệ tử vong của NHPB nhiễm

tôm 1 đến 7 d sau. Dấu hiệu nhiễm trùng khác

gan tụy hết sức nhợt nhạt có thể nhìn thấy qua

ngày mai trước khi tử vong.

Survival curvessdsdsdsdsdsd

Sự tồn tại xác suất của NHPB

tôm tôm bị nhiễm bệnh và kiểm soát

trang bị cho một phân phối Weibull

cho phép một tham số mạnh mẽ hơn

phân tích hơn nonparametric Kaplan-

Meier phân tích (Lee & Wang 2003).

Các thông số Weibull ước tính cho

Tôm bị nhiễm bệnh NHPB-β = 4.33, η =

37,02 và γ = 1. Dự kiến ​​Weibull para-

mét cho tôm kiểm soát β = 3,44,

η = 74,14 và γ = -2.

Survival phân tích so sánh-sur

vival những đường cong để chỉ NHPB-tích cực

tôm trong thách thức I và II đã tiết lộ

không có sự khác biệt, do đó, dữ liệu từ cả hai

những thách thức chung (Bảng 1). Mor-

tality do để NHPB bắt đầu 16 d bài

tiếp xúc và kết thúc 51 d sau khi tiếp xúc

(Hình 1). Kiểm soát tôm có kinh nghiệm

một tỷ lệ tử vong nền bắt đầu từ

Ngày 19. Thời gian tồn tại trung bình

NHPB tôm dương tính (nghĩa là thời gian cho đến chết

50%) là 34,5 d, trong khi trung bình

thời gian sống sót của tôm kiểm soát

lớn hơn 60 d. Sự tồn tại đường cong

tạo ra cho NHPB và kiểm soát ani

mals có ý nghĩa khác nhau, với

thấp hơn sự sống còn quan sát thấy trong NHPB-dương

chính kịp thời (p <0,001, hình 1).

Đường cong sống còn và quá trình nhiễm trùng

Hình 2 cho thấy một người sống sót-giả thuyết

tàu đường cong với 3 giai đoạn riêng biệt mà

tương ứng với prepatent, cấp tính và

trạng thái của nhiễm trùng mãn tính. Transi-

tion từ một tiểu bang kế tiếp được đánh dấu

bởi một sự thay đổi trong tỷ lệ tử vong. Các

thời gian nhà nước hoặc ủ bệnh prepatent

đặc trưng bởi một khoảng thời gian của asympto

matic bệnh tật và sự sống còn một tỷ lệ hàng ngày

tương tự như máy chủ không bị nhiễm bệnh. Trong nhà nước prepatent,

mầm bệnh nhân. Nhiễm trùng prepatent

nhà nước bắt đầu tiếp xúc ngay lập tức sau đây.

tác nhân gây bệnh và tiếp tục cho đến khi một gia tăng hàng ngày mor

tality là quan sát. Điểm này đánh dấu sự khởi đầu của

tình trạng cấp tính. Công khai các dấu hiệu lâm sàng của bệnh và mor

tality đặc trưng cho tình trạng cấp tính. Trong các giả thuyết

nhiễm trùng, tình trạng cấp tính kéo dài cho đến khi giảm mor-

tality tỷ lệ xảy ra. Nhiễm nhà nước mãn tính xảy ra khi

một con vật bị nhiễm bệnh không chết vì nhiễm trùng nhưng

vẫn còn là một tàu sân bay của căn bệnh này. Không tất cả các truyền nhiễm

đại lý có một nhà nước mãn tính.

230

Hình 1. Sự tồn tại đường cong của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus Kona chứng khoán tiếp xúc với mỗi hệ điều hành

Hoại tử Hepatopancreatitis Vi khuẩn (NHPB) và kiểm soát (p <0,001).

h: NHPB; s: kiểm soát sự tồn tại, dòng rắn: Weibull tồn tại chức năng tốt nhất phù hợp với

NHPB tồn tại, dòng tiêu tan: chức năng phù hợp để kiểm soát sự sống còn. Có là một đáng kể

không thể khác biệt giữa 2 đường cong sống sót

Hình 2. Quá trình nhiễm trùng bao gồm cả các bệnh prepatent, cấp tính và mãn tính

trong một đường cong sống sót giả thuyết. Đường thẳng đứng lao đánh dấu điểm mà mor-

tality thay đổi, có nghĩa quá trình chuyển đổi từ một tiểu bang nhiễm tiếp theo trên

sự tồn tại đường cong. Trạng thái Prepatent và mãn tính được đặc trưng bởi tỷ lệ tử vong thấp,

trong khi đó nhà nước cấp được đặc trưng bởi mortalityVincent cao et al: mỗi hệ điều hành tiếp xúc của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus NHP vi khuẩn

Chúng tôi quan sát trạng thái prepatent và cấp tính cho

quá trình nhiễm trùng trong tôm thẻ chân trắng Litopenaeus tiếp xúc

đường miệng NHPB (Hình 3). Nhà nước prepatent hoặc incuba

tion khoảng thời gian của NHPB bắt đầu sau khi tiếp xúc và kéo dài

15 d sau phơi nhiễm. Tỷ lệ tử vong, và do đó nhà nước cấp,

bắt đầu vào lúc 16 d tiếp xúc với hậu và tiếp tục 51 d

sau khi tiếp xúc. Trong tôm cấp, kinh nghiệm

enced một xác suất tử vong cao hàng ngày. Làm thế nào

bao giờ hết, không có giảm tiếp theo tỷ lệ tử vong đã được ghi nhận.

Của tôm còn sống tiếp xúc vào cuối của d 60

thời gian, không được chẩn đoán là NHPB dương tính

thông qua PCR. Có thể rằng một số tôm còn sống

60 d sau phơi nhiễm có xét nghiệm âm tính bằng phương pháp PCR trong

cluded những người đã từng mang một NHPB

nhiễm trùng nhưng đã bị mất kể từ khi nhiễm trùng.

Tuy nhiên, phân tích mô học ở những

tôm sống tại 60 d tiếp xúc với hậu đã làm

không tiết lộ bất kỳ dấu hiệu lâm sàng của nhiễm qua-

tion. Trong vòng giới hạn của chúng tôi phát hiện, không có

Tôm NHPB nhiễm được coi là

có bị mất hoặc bị nhiễm trùng hoặc vẫn còn một

tàu sân bay của nhiễm trùng NHPB. Do đó, một-Chro

nhà nước nic đã không được phát hiện và recov

tỷ lệ phát hiện phần cứng (ρ) được coi là 0.

Tỷ lệ tử vong ở trạng thái nhiễm trùng cấp tính

Tỷ lệ tử vong hàng ngày trong

cấp nhà nước của NHPB nhiễm trùng là không

không đổi nhưng tăng theo thời gian. Các

xác suất tử vong vào lúc bắt đầu

nhà nước cấp thấp hơn gần

kết thúc. Tuổi cụ thể tỷ lệ tử vong vấn

khả năng được thể hiện trong hình. 4. Mặc dù

các mô hình dịch giả định một tỷ lệ không đổi

tỷ lệ tử vong cấp tính, quan sát thấy tỷ lệ

không đổi theo thời gian. Tuy nhiên,

cho các mục đích mô hình hóa, trung bình của

tỷ lệ tử vong nhà nước cấp hàng ngày có thể được sử dụng

như là một ước tính của NHPB cấp nhà nước hàng ngày

tử vong. Sau khi hiệu chỉnh lại

mặt đất tử vong, có nghĩa là điều chỉnh

tỷ lệ tử vong nhà nước cấp hàng ngày từ NHPB

là 0,09.

THẢO LUẬN

Việc duy trì lâu dài và thách thức

lenge mô hình NHPB trong Litopenaeus

tôm thẻ chân trắng thông qua tiếp xúc với mỗi hệ điều hành

được tài liệu. Hệ thống dài hạn

tem cung cấp cho một nguồn cung cấp liên tục

NHPB nhiễm trùng cho các thí nghiệm. Các

thách thức mô hình cho phép quan sát ngắn hạn của

NHPB nhiễm ở động vật nhạy cảm từ một đơn

truyền tải sự kiện trong các điều kiện được kiểm soát. Al-

Mặc dù tỷ lệ tử vong nền đã được quan sát, chúng tôi đã

có thể loại bỏ tỷ lệ tử vong nền từ dự toán

NHPB gây ra tử vong nhà nước cấp hàng ngày.

Do thiếu trong các phương pháp nuôi cấy in vitro cho NHPB,

trong việc bảo trì cơ thể sống là cần thiết. NHPB nhiễm

duy trì liên tục trong cơ thể bằng cách thêm ngây thơ sus

ceptible cá nhân với một dân số tôm kinh nghiệm

encing bệnh NHPB. Trong bảo trì dài hạn

hệ thống, số lượng các bệnh nhiễm trùng NHPB giảm

dân số hoặc từ việc loại bỏ các loài động vật bị nhiễm bệnh

231

Hình 3. Quá trình nhiễm trùng với các trạng thái bệnh prepatent và cấp tính liên quan đến

đường cong sống sót của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus Kona chứng khoán tiếp xúc với mỗi hệ điều hành để NHPB.

h: NHPB tồn tại, dòng rắn: Weibull tồn tại chức năng tốt nhất phù hợp với sự sống còn NHPB.

Bệnh tiểu bang prepatent và cấp được phân cách bởi một đường đứt đoạn theo chiều dọc

Hình 4. Xác suất tử vong hàng ngày trong trạng thái nhiễm trùng cấp tính ở Kona chứng khoán

Litopenaeus vannamei tiếp xúc mỗi os NHPB và điều khiển. h: NHPB s: con

trol tử vong hàng ngày, dòng rắn: đường cong tỷ lệ tử vong NHPB tạo ra từ phù hợp nhất

chức năng nguy hiểm Weibull. Tỷ lệ tử vong ước tính trung bình hàng ngày từ

NHPB nhiễm trùng là α = 0.09Dis Aquat Org 61: 227-233, 2004

thông qua ăn thịt người hoặc cho các mục đích thử nghiệm.

Này trình bày khó khăn trong việc có được một số lượng lớn

truyền nhiễm vật liệu. Trong 2 thách thức của chúng tôi, một sự khác biệt

đã được quan sát giữa% tôm tiếp xúc

đã kiểm tra NHPB tích cực thông qua PCR, cao hơn

% NHPB tích cực trong việc thách thức hơn so với các thách thức-

lenge II. Số lượng lớn hơn của truyền nhiễm NHPB mater-

ial cần thiết cho Challenge II có thể đã gây ra rất nhiều

vật liệu bị nhiễm bệnh được pha loãng với nhẹ nhiễm

vật chất trong nỗ lực của chúng tôi để lộ một số lượng lớn

tôm. Như vậy, sự khác biệt theo phần trăm của NHPB-

tích cực tôm giữa 2 thách thức có thể có

được liên quan với liều.

Mô hình dịch giả định không đổi

tỷ lệ tử vong theo thời gian cho mỗi tiểu bang

nhiễm trùng. Tuy nhiên, xác suất của

tỷ lệ tử vong liên quan với tình trạng cấp tính

của NHPB không liên tục và trong thực tế

tăng theo thời gian. Sự phát triển của

dịch mô hình kết hợp này

quan sát thay đổi trong tỷ lệ tử vong trên

thời gian có thể cung cấp một dự báo tốt hơn

mô hình động lực bệnh.

Các khóa học của một bệnh nhiễm trùng NHPB trong

Kona chứng khoán Litopenaeus vannamei exhib

ited động lực khác nhau hơn khác viru

cho vay truyền nhiễm bệnh của tôm như

Hội chứng virus đốm trắng (WSSV) và

Taura Syndrome Virus (TSV) (Soto &

Lotz 2001, Lotz Soto & 2002, Lotz et al.

2003). So với WSSV và

TSV, NHPB trưng bày nhiều thời gian hơn trước

bằng sáng chế nhà nước chỉ mang tính của chậm hơn

phát triển và một thời gian lâu hơn để đạt được một

nhiễm trùng gây chết người hơn hoặc WSSV hoặc TSV

(Hình 5). WSSV (2 đến 11 d sau phơi nhiễm)

và TSV (3 đến 18 d sau phơi nhiễm) cũ

hibit bang cấp tính tương đối ngắn của nhiễm

tion (Soto & Lotz 2001, Lotz & Soto 2002,

Lotz et al. 2003) trong khi nhiễm cấp tính

tion trong NHPB bắt đầu gần 13 d sau

và kéo dài hơn 20 d còn hơn so với các cấp

nhà nước của một trong hai WSSV hoặc TSV. Ngoài ra,

WSSV và TSV sản xuất nhiễm trùng gây chết người

với tốc độ nhanh hơn NHPB.

Các đường cong tồn tại TSV đạt đến một

điểm mà xác suất tồn tại hàng ngày

tăng tôm bị nhiễm bệnh, cho thấy

chuyển đổi từ cấp tính

nhà nước của nhiễm trùng mãn tính (Hình 6). Ani-

mals trong tình trạng mãn tính được coi là

người sống sót sau nhiễm trùng TSV, tuy nhiên,

những người sống sót vẫn còn tàu sân bay và

nguồn bị nhiễm bệnh dễ bị ani

mals. Nhà nước cấp của WSSV và

NHPB vẫn còn cho đến khi tất cả các loài động vật bị nhiễm bệnh chết.

Vì vậy, trong công việc của phòng thí nghiệm của chúng tôi, không WSSV cũng không

NHPB nhiễm trùng có chứa một mãn tính hoặc người vận chuyển đáng kể

nhà nước và tất cả các loài động vật bị nhiễm bệnh không chống đỡ nổi với bệnh.

Sự vắng mặt của một nhà nước mãn tính có thể là một characteris

tic của NHPB nhiễm trùng ở tôm thẻ chân trắng Litopenaeus. Một

nhà nước mãn tính được quan sát trong L. tôm thẻ chân trắng bị nhiễm bệnh với

TSV nhưng là hiếm hoặc vắng mặt trong WSSV và NHPB nhiễm

da được tốt. Sự vắng mặt của một nhà nước mãn tính nhiễm trong NHPB

cho thấy động lực bệnh liên quan đến nhiễm trùng tiểu bang

tương tự như của WSSV hơn TSV.

Ăn thịt của tôm chết và chết vì bị nhiễm

NHPB dường như là một chế độ tự nhiên của truyền

232

Hình 5. So sánh các đường cong sống sót NHPB để tạo ra cho các virus

tác nhân gây bệnh WSSV (White Spot Syndrome Virus) và TSV (Taura Syndrome

Virus) trong Kona chứng khoán Litopenaeus vannamei. NHPB sống sót được tạo ra trong của chúng tôi

nghiên cứu cũng được hiển thị. Dữ liệu cho WSSV và TSV từ J. M. Lotz (unpubl.)

Hình 6. So sánh tỷ lệ tử vong cấp tính NHPB nhà nước hàng ngày của virus

tác nhân gây bệnh WSSV và TSV ở tôm thẻ chân trắng Litopenaeus Kona chứng khoán.h: NHPB hàng ngày

tỷ lệ tử vong tạo ra trong nghiên cứu của chúng tôi;: NHPB đường cong tỷ lệ tử vong cấp nhà nước. Dữ liệu cho

WSSV (s) và TSV (n) từ J. M. Lotz (unpubl.). Dashed dòng: hàng ngày tử vong

đường cong của nhà nước cấp cho WSSV; rắn dòng: TSVVincent et al: mỗi os tiếp xúc của tôm thẻ chân trắng Litopenaeus NHP vi khuẩn.

môi trường ao nuôi tôm. Ước tính của thêm

các thông số dịch tễ học của NHPB, chẳng hạn như proba

xây dựng xong truyền tải và xác suất của sự phân hủy của

vật liệu truyền nhiễm hoặc dài NHPB vẫn nhiễm

tious trong tôm chết hoặc sắp chết (Soto & Lotz 2001), có thể

cho phép việc sử dụng một mô hình toán học cho dự đoán

ing sự năng động của NHPB trong một ao nuôi trồng thủy sản.

Lời cảm ơn. Các tác giả muốn cảm ơn M.

Frentz và M. Turner cho hỗ trợ kỹ thuật, và R. Blaylock

và 3 vô danh nhận xét cho ý kiến ​​về

bản thảo. Nghiên cứu này được hỗ trợ một phần bởi

Hoa Kỳ Sở Nông nghiệp CSREES Grant số

2002-38808-01381.

TÀI LIỆU trích dẫn

Braasch DA, Ellender RD, Middlebrooks BL (1999) di động chu kỳ

các thành phần và tác động tiềm năng của họ phát triển

của liên tục sao chép tế bào trong ống nghiệm penaeid.

Phương pháp di động Khoa học 21:255-261

DiagXotics ® (2002) ShrimPCaRe ™ Primer Simplex Kit cho

NHP. DiagXotics, Wilton, CT

Frelier PF, Sis RF, Bell TA, DH Lewis (1992) kính hiển vi và

siêu nghiên cứu về Hepatopancreatitis hoại tử

ở Thái Bình Dương tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei) nuôi trong

Texas. Vet Pathol 29:269-277

Frelier PF, Loy JK, Kruppenbach B (1993) lây truyền

Hoại tử Hepatopancreatitis Penaeus vannamei.

J Invertebr Pathol 61:44-48

Johnson SK (1990) Sổ tay của bệnh tôm. Texas A & M

Biển Grant College Chương trình Galveston, TX

Krol RM, Hawkins CHÚNG TÔI, Overstreet RM Rickettsial (1991) và

mollicute nhiễm trùng trong các tế bào hepatopancreatic của văn hóa

Thái Bình Dương tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei). J Invertebr

Pathol 57:362-370

Lee ET, JW Wang (2003) phương pháp thống kê cho dữ liệu tồn tại

phân tích, 3 edn. John Wiley & Sons, New York

Lightner DV (1996) Một cuốn sổ tay của bệnh lý và chẩn đoán

thủ tục cho bệnh của tôm penaeid. Thế giới Aqua-

Xã hội văn hóa, Baton Rouge, LA

Lightner DV, RM Redman (1994) Một bịnh dịch thú của hoại tử

Hepatopancreatitis trong nuôi tôm penaeid (crus-

tacea: Decapoda) ở tây bắc Peru. Nuôi trồng thủy sản 122:

18/09

Lightner DV, RM Redman, Bonami JR (1992) hình thái

bằng chứng về một nguyên nhân vi khuẩn duy nhất ở Texas Necrotiz

ing Hepatopancreatitis Penaeus tôm thẻ chân trắng (giáp xác:

Decapoda). Dis Aquat Org 13:235-239

Lotz JM, Soto MA (2002) Mô hình của vi rút Hội chứng địa điểm trắng

(WSSV) dịch bệnh ở tôm thẻ chân trắng Litopenaeus. Dis Aquat

Org 50:199-209

Lotz JM, Hoa AM, Breland V (2003) Một mô hình của Taura

Hội chứng virus (TSV) bệnh dịch Litopenaeus van

namei. J Invertebr Pathol 83:168-176

Loy JK, Dewhirst FE, Weber W, Frelier PF, Garbar TL, Tasca

SI, Templeton JW (1996) phân tử phát sinh học và tại chỗ

phát hiện của các tác nhân bệnh nguyên của hoại tử Hepatopan

creatitis trong tôm. Appl môi trường Microbiol 62:3439-3445

Pruder GD, Brown CL, chứng gầy mòn bắp thịt ngựa JN, Carr WH (1995)

hệ thống y tế tôm: hạt giống cung cấp lý thuyết và thực tiễn

tice. : Browdy CL, Hopkins JS (eds) bơi qua

gặp rắc rối nước. Căn cứ của khoá họp đặc biệt trên

Nuôi tôm. Thế giới Aquacult Sóc, Baton Rouge, LA,

p 40-52

Soto MA, Lotz JM (2001) các thông số dịch tễ học

Trắng địa điểm Hội chứng nhiễm trùng vi-rút trong Litopenaeus van

namei và L. setiferus. J Invertebr Pathol 78:9-15

SPSS (2000) systat Phiên bản 10.0 & SPSS Phiên bản 11,5. SPSS,

Richmond, CA

233

Biên tập chịu trách nhiệm: Timothy Flegel,

Bangkok, Thái Lan

Nộp: 07 Tháng Sáu 2004; Chấp nhận: Tháng 26 năm 2004

Bằng chứng nhận được từ tác giả (s): 14 tháng 10 năm 2004